在科研實(shí)驗(yàn)中一般用到的現(xiàn)成細(xì)胞系/株，我們只需要進(jìn)行細(xì)胞傳代和保種。然而，這些細(xì)胞系常常由于體外長(zhǎng)期培養(yǎng)，而丟失原有生物學(xué)特性，對(duì)藥物處理的反應(yīng)差距越來(lái)越大。
小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞直接從機(jī)體取出的細(xì)胞或從組織獲得的單個(gè)細(xì)胞，并可以在體外進(jìn)行培養(yǎng)。這里的組織主要指：器官、外周血及胚胎等。
小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞離體時(shí)間短，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)，且生物性狀尚未發(fā)生很大改變。因此在藥物篩選、細(xì)胞移植、類器官培養(yǎng)、腫瘤研究等眾多領(lǐng)域備受歡迎。
但組織消化過(guò)程中常遇到多種問(wèn)題，例如消化不*、細(xì)胞死亡率高等。如何克服這些問(wèn)題，消化酶的選擇是關(guān)鍵。本文將為您介紹一些常用的消化酶及其適用組織，供您參考。
1、Trypsin（胰酶）
從牛和人的胰腺中得到的粗提物；通過(guò)作用于與賴氨酸或精氨酸相連接的肽腱，除去細(xì)胞間粘蛋白及糖蛋白，影響細(xì)胞骨架，從而使細(xì)胞分離。
胰蛋白酶適用于消化細(xì)胞間質(zhì)較少的軟組織，如胚胎、上皮、肝、腎等組織。但對(duì)于纖維組織和較硬的癌組織的效果差，常常將胰蛋白酶與其他消化酶聯(lián)合使用。
2、Collagenase（膠原酶）
酶法組織消化中常用的膠原酶，能特異性地降解胞外膠原蛋白，使膠原蛋白和纖維粘連蛋白的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)解離，而不損壞細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)的完整性。
由于細(xì)胞外基質(zhì)的成分復(fù)雜，除膠原蛋白外，還含有彈性蛋白，糖蛋白等其他大分子結(jié)構(gòu)。而且不同組織類型，不同物種來(lái)源，不同年齡的組織中胞外基質(zhì)組份不同。
所以商業(yè)化的膠原酶產(chǎn)品一般是梭狀芽孢桿菌裂解液的粗提物，是膠原酶、胰蛋白酶等蛋白水解酶混合物，能降解膠原蛋白和其他蛋白，及多糖等胞外大分子物質(zhì)，適用于多種組織的消化應(yīng)用。
3、Dispase（分散酶）
Dispase是一種純化的中性蛋白酶，用于小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞的制備，由于其溫和的特性，細(xì)胞外基質(zhì)的消化,不損傷細(xì)胞膜，在消化過(guò)程中對(duì)細(xì)胞造成的損傷極小，它還能用于細(xì)胞的次代培養(yǎng)，也可用于細(xì)胞懸液中的聚團(tuán)消化解聚。
提取自多黏芽孢桿菌，杜絕了支原體污染的可能性，在寬泛的pH和溫度條件下具有良好的穩(wěn)定性，因此在組織消化過(guò)程中的表現(xiàn)比膠原酶更加穩(wěn)定。
更新時(shí)間：2022-09-09
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